Penerapan Teknik Kromogenik pada Uji Endotoksin Bakteri

Teknik kromogenik merupakan salah satu dari tiga teknik yang juga mencakup teknik gel-clot dan teknik turbidimetri untuk mendeteksi atau mengukur endotoksin dari bakteri Gram negatif dengan menggunakan lisat amoebosit yang diekstraksi dari darah biru kepiting tapal kuda (Limulus polyphemus atau Tachypleus tridentatus).Ini dapat diklasifikasikan sebagai pengujian kromogenik titik akhir atau pengujian kromogenik kinetik berdasarkan prinsip pengujian tertentu yang digunakan.

Prinsip reaksinya adalah: lisat amebosit mengandung rangkaian enzim serin protease (proenzim) yang dapat diaktifkan oleh endotoksin bakteri.Endotoksin mengaktifkan proenzim untuk menghasilkan enzim yang diaktifkan (disebut koagulase), yang terakhir mengkatalisis pemecahan substrat tidak berwarna, melepaskan produk pNA berwarna kuning.PNA yang dilepaskan dapat diukur secara fotometrik pada 405nm.Dan serapannya berkorelasi positif dengan konsentrasi endotoksin, maka konsentrasi endotoksin dapat diukur sesuai.


Waktu posting: 29 Sep-2019