Tes endotoksin bakterial (BET) dilakukan di sebagian besar laboratorium modern dalam kondisi terkendali sebagai faktor penting untuk menghindari gangguan.
Sesuaiteknik aseptikpenting ketika mempersiapkan dan mengencerkan standar dan menangani sampel.Gaunpraktik di luar alat pelindung diri laboratorium biasa (APD) persyaratan tidak menjadi perhatian kecuali produk yang diuji memerlukan pertimbangan keselamatan analis khusus karena toksisitas atau penularannya.Sarung tanganharus bebas TALC, karena TALC mungkin mengandung endotoksin dalam jumlah besar.Pembaca piring, penangas air, dan blok pemanas keringdigunakan untuk inkubasi sampel harus berada di bangku laboratorium jauh dari saluran pemanas, ventilasi, dan pendingin udara (HVAC), getaran signifikan, dan lalu lintas laboratorium yang dapat mempengaruhi hasil pengujian.Waktu dan kondisi penahanan sampelharus ditentukan dan selanjutnya didokumentasikan, jika perlu, untuk memastikan bahwa hasil pengujian yang akurat dapat dihasilkan dalam waktu yang memenuhi syarat.
Misalnya, jika laboratorium menerima sampel Air untuk Injeksi (WFI) atau sampel dalam proses, apakah sampel tersebut harus disimpan di lemari es atau dapat disimpan pada suhu kamar, dan untuk berapa lama?Sebelum pengujian, disarankan agar wadah sampel utama dicampur secukupnya sebelum mengeluarkan cairan uji untuk pengujian langsung atau pengenceran berikutnya.
Uji Endotoksin Bakteri Bioendo, termasuk eksperimennyametode gumpalan geluji uji endotoksin danuji uji endotoksin kuantitatif, metode uji endotoksin metode bekuan gel adalah deteksi endotoksin kualitatif, percobaan ini memerlukan bahan habis pakai adalah proses depirogenasi, seperti tabung reaksi bebas endotoksin, tabung pengenceran dan ujung bebas pirogen;deteksi endotoksin kuantitatif memiliki uji endotoksin kromogenik kinetik, uji endotoksin turbidimetri kinetik, percobaan ini memerlukan bahan habis pakai yang harus memenuhi tingkat endotoksin tertinggi kurang dari0,005EU/ml(0,001EU/ml), seperti tabung bebas endotoksin, ujung bebas pirogen, dan pelat mikro bebas pirogen, bahkan reservoir bebas pirogen.Ngomong-ngomong, jika sampelnya dirawat, wadahnya harus berupa botol sampel bebas endotoksin.
Dalam pengujian endotoksin, gangguan dapat timbul dari berbagai sumber, seperti komponen matriks sampel, reagen uji, atau peralatan.
Untuk menghindari gangguan percobaan, langkah-langkah berikut dapat diambil:
1. Persiapan Sampel: Persiapan sampel yang tepat sangat penting untuk pengujian endotoksin yang akurat.
Matriks sampel harus diuji secara menyeluruh dan dioptimalkan untuk memastikan kompatibilitas dengan uji endotoksin.
Secara khusus, zat pengganggu seperti lipid dan protein harus dihilangkan atau diminimalkan dengan menggunakan teknik yang tepat seperti filtrasi atau sentrifugasi.
2. Kontrol Positif dan Negatif: Penting untuk memasukkan kontrol positif dan negatif dalam pengujian untuk memantau interferensi.
Kontrol positif mengonfirmasi fungsionalitas pengujian, sedangkan kontrol negatif mendeteksi kontaminasi atau gangguan apa pun dari komponen pengujian.
3. Pengendalian Mutu: Pengendalian mutu harus dilakukan pada semua reagen, peralatan, dan air yang digunakan dalam pengujian.
Hal ini memastikan bahwa reagen bebas dari kontaminasi endotoksin dan bekerja dengan benar.
4. Standardisasi: Pengujian harus distandarisasi untuk memastikan bahwa semua hasil dapat dibandingkan dan dapat direproduksi.
Hal ini melibatkan penggunaan kurva standar untuk mengkalibrasi pengujian dan penggunaan teknik standar untuk persiapan sampel, inkubasi, dan deteksi.
5. Validasi: Pengujian harus divalidasi untuk memastikan bahwa pengujian tersebut spesifik, sensitif, dan dapat diandalkan.
Hal ini melibatkan pengujian sejumlah sampel, termasuk sampel yang diketahui mengandung endotoksin, untuk menentukan keakuratan dan ketepatan pengujian.
Dengan mengikuti langkah-langkah ini, gangguan dapat diminimalkan, dan pengujian endotoksin yang akurat dapat dicapai.
Waktu posting: 01 Des-2022
